La civiltà etrusca conobbe la sua fine attorno al III secolo a.C. quando venne sottomessa dall'esercito Romano.
Volterra diventò una città fondamentalmente a vocazione agricola, risorsa Romana per frumenti e legnami.
Nel 90 a.C. Volterra ottenne la cittadinanza Romana. Il grande teatro romano, le imponenti terme e i numerosi affreschi testimoniano questo importante momento.
Durante gli anni successivi Volterra si affermò sempre di più come centro ecclesiastico.